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液相色谱在使用过程中的注意事项

发布时间:2022-09-21   点击次数:30次
  液相色谱在使用过程中的注意事项
  一、色谱柱的问题:
  不同类型的色谱柱,使用一样的清洗方法会对色谱柱的分析有影响吗?色谱柱会因品牌的不同都会有不同的对应的清洗要求,可以查找色谱柱的说明书或者查找资料和请教有经验的色谱工作者进行操作,否则盲目操作有可能会造成色谱柱效下降和色谱柱的使用寿命缩短。如果发现柱内条件变化了,需要稳定进样条件,调节流动相。不少做色谱实验的技术人员平时可能也会碰上这样的一个问题:如果不及时补充流动相,泵会将溶剂瓶中的流动相吸干了会不会影响色谱柱呢?答案是不会的!因为泵里面充满了空气,但是泵也不会将空气排入色谱柱的,泵只传送液体不传送空气。液相色谱柱采用不锈钢制成,色谱柱中填充了键合硅胶或聚合物填料,有多种尺寸规格可供选择。
  二、填料孔径的选择:
  可以根据化合物分子量来确认色谱柱填料的孔径,但我们通常都会选择C18柱作为普遍使用的色谱条件。因为C18柱是我们使用得比较多的也是对色谱保留性能相对熟悉的。硅胶基质的色谱填料是目前应用特别广泛的液相色谱固定相基质,其理化性质适用于各种分析和制备分离。 而USHA C18色谱柱填料,具有高选择和高分离度的特点,广泛用于分析极性物质和疏水性物质。
  三、使用PEEK管路和接头:
  如果检测数量多经常使用色谱仪,需要改变流路或更换不同品牌的色谱柱,使用PEEK材料制成的管路和接头会方便很多。PEEK管路相对容易连接,PEEK接头不需要用到工具只需要手拧就可以了,而且还与不同厂家或规格的色谱柱相匹配。PEEK高性能聚合物都能表现出很好的耐磨损性能,能在较大压力、速度、温度和接触面粗糙度范围内。
  四、出现拖尾、双峰或出现鬼峰:
  如果是筛板堵塞或柱失效,可以尝试反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。如果是存在干扰峰的现象,我们可以用长一点的柱子去更换流动相。如果是柱超载,则减少进样量。如果是出现鬼峰比如进样阀残余峰,可能为上次样品的残余,可以在每次进完样后用充足的时间来平衡和清洗系统。鬼峰捕集柱,可以有效的捕集流动相中的杂质和更好的处理鬼峰,从而大大缩短了检测分析的时间。
  五、工作中的 液相色谱的仪器状态:
  泵压直接反映了色谱柱和整个液相色谱系统的状况,如果压力过低会有漏液的现象; 如果压力过高会导致柱子或者管路堵塞;如果压力波动过大很有可能是因为泵入口处堵塞, 系统内有气泡,又或者是进样阀出了故障,所以操作人员平时上机测试的时候要养成随时注意泵压的好习惯。
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